細(xì)胞*培養(yǎng)基優(yōu)化的步驟怎樣的
更新時(shí)間:2022-08-04 點(diǎn)擊次數(shù):1138
培養(yǎng)基既是供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和增殖的環(huán)境,所以非常重要。細(xì)胞培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上,添加了碳水化合物、氨基酸、脂類、無機(jī)鹽、維生素、微量無素和細(xì)胞生長因子等。
細(xì)胞*培養(yǎng)基是人工模擬動(dòng)物細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境,維持體外細(xì)胞存活和增殖的營養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ),其主要功能是為細(xì)胞提供適宜的pH和滲透壓,以及細(xì)胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質(zhì),才能滿足新細(xì)胞合成、細(xì)胞代謝等生化反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質(zhì)等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。
細(xì)胞*培養(yǎng)基優(yōu)化步驟:
1 選擇不同的培養(yǎng)基,進(jìn)行單因素多水平測(cè)試,測(cè)試不同培養(yǎng)基對(duì)培養(yǎng)的影響;
2 對(duì)有機(jī)氮源進(jìn)行氨基酸分析,這一步最好是由培養(yǎng)基提供商和制藥商配合進(jìn)行,或者請(qǐng)有符合認(rèn)證的商業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)提供服務(wù);
3 數(shù)據(jù)處理,根據(jù)不同培養(yǎng)基氨基酸水平,可以計(jì)算出每個(gè)測(cè)試中初始氨基酸的組成,然后再使用方差分析,計(jì)算每種氨基酸對(duì)培養(yǎng)結(jié)果的影響。
4 驗(yàn)證,如果方差分析結(jié)果顯示某種或某些氨基酸是關(guān)鍵因素,則可以通過添加或稀釋或混合使這些氨基酸達(dá)到優(yōu)化的含量,然后經(jīng)過測(cè)試,確定優(yōu)化配方。