熒光PCR檢測試劑盒檢測方法的局限性有什么?
更新時間:2022-11-07 點擊次數(shù):1158
熒光PCR檢測試劑盒的實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR過程,然后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。它在熒光免疫分析中常用于標記抗原或抗體,也可用于檢測微環(huán)境的微觀特征,如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質活性位點等。一般要求探針具有大摩爾吸收系數(shù)和高熒光量子產(chǎn)率;熒光發(fā)射波長為長波,具有較大的斯托克斯位移;用于免疫測定時,與抗原或抗體的結合不得影響其活性。
熒光PCR檢測試劑盒產(chǎn)品特性介紹:
重復性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少。
靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,抑制非特異性擴增。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
熒光PCR檢測試劑盒檢測方法的局限性有什么?
1.樣品檢測結果與樣品采集、加工、運輸和保存的質量有關;
2.如果在樣品提取過程中沒有很好地控制交叉污染,可能會出現(xiàn)假陽性結果;
3.陽性對照和擴增產(chǎn)物的泄漏將導致假陽性結果;
4.病原體在流行過程中的基因突變和重組會導致假陰性結果;
5.不同的提取方法提取效率不同,會導致假陰性結果;
6.試劑運輸、儲存不當或試劑制備不準確導致試劑檢測效率下降、假陰性或定量檢測結果不準確;
7.測試結果僅供參考。如果需要診斷,請結合臨床癥狀和其他檢測方法。